شناسایی و همسانه سازی ژن موتان سوکراز کوتاه شده ( (gtficat)باکتری streptococcus downei mfe28 برای بیان در گیاه چغندرقند (beta vulgaris l.)

گلوکان سوکراز ها (glucansucrases)، آنزیم های خارج سلولی هستند که انواعی از گلوکان ها از قبیل دکستران، موتان، آلترنان و روتران را از ساکاروز سنتز می کنند. موتان سوکرازی (gtfi) که توسط باکتری streptococcus downei mfe28 تولید می شود، از ساکاروز بیوپلیمری مهم به نام موتان (mutan) را سنتز می کند. واحدهای گلوکز در موتان عمدتاً با پیوندهای گلوکوزیدی a(1®3) با کمی انشعاب a(1®6) به هم متصل شده اند. یک سامانه ی ژنی (construct) به کمک یک جفت آغازگر اختصاصی به گونه ای طراحی شد که فقط دمین کاتالیتیکی و ناحیه ی متغیر آنزیم به طول 3034 جفت باز توسط pcr با استفاده از pfu پلی مراز تکثیر شد. قطعه مورد نظر در نهایت در ناقل بیانی pbinplus همسانه سازی شد. چغندرقند(beta vulgaris l.) یکی از مهمترین گیاهان صنعتی دنیا است. به منظور بررسی و بهینه سازی کشت بافت چغندرقند برای بیان سامانه ی مورد اشاره، یک آزمایش به صورت فاکتوریل 2´2´3 با 12 ترکیب تیماری در قالب یک طرح کاملاً تصادفی با 4 تکرار و در هر تکرار 10 ریزنمونه، در آزمایشگاه انجام شد. فاکتورهای این آزمایش سه نوع ریزنمونه ی پهنک برگ، دمبرگ و جوانه ی رأسی، دو محیط کشت a (mgl-15/0 هورمون کینتین و mgl-11 هورمون ba) و محیط کشت b (mgl-11 هورمون کینتین و mgl-15/0 هورمون ba) و دو لاین چغندرقند sbsi-04) و (sbsi-02 بودند. نتایج تجزیه واریانس داده های درصد جوانه زنی نشان داد که اثر نوع ریزنمونه، لاین و اثر متقابل ریزنمونه´لاین روی درصد جوانه زنی معنی دار (p£0.01) گردید. با توجه به نتایج مقایسات میانگین به روش دانکن (p£0.01)، ریزنمونه ی جوانه ی رأسی در هر دو لاین با ریزنمونه ی پهنک لاین sbsi-04 تفاوت معنی داری از نظر درصد تولید جوانه نداشتند. همچنین، تفاوت معنی داری بین درصد جوانه زایی ریزنمونه ی پهنک لاین sbsi-02 با ریزنمونه ی دمبرگ لاین sbsi-04 وجود نداشت. به علاوه، ریزنمونه ی دمبرگ لاین sbsi-02 با تولید کمترین درصد جوانه با سایر ریزنمونه ها اختلاف معنی داری داشت.